不同的實驗設計可采用不同的曠場實驗結果參數(shù)進行統(tǒng)計分析,目前比較常用的結果參數(shù)主要有以下幾種。
總路程
可進一步劃分為中央格路程和周圍格 路程,反映鼠的活動能力。鼠在新環(huán)境中是由緊張、興奮、探索再到適應的一系列過程,處于興奮狀 態(tài)的小鼠表現(xiàn)為行動活躍,四處走動,總路程增加。當小鼠處于抑郁狀態(tài)時,其運動路程明顯縮短,但總路程過長反映鼠對新環(huán)境的恐懼。值得注意的是,學習和記憶能力受損不會引起與小鼠運動能力相關的參數(shù)變化 ,亦不會導致曠場實驗中焦慮行為的產生。
運動時間
指鼠在曠場實驗中運動的總時間, 分為中央格運動時間和周圍格運動時間。
靜止時間
指視頻分析系統(tǒng)根據(jù)人為設定的不 動閾值所計算出的動物完全靜止的時間。靜止時間反映動物的焦慮水平和運動能力,靜止時間越長說明動物焦慮程度越高,抑郁程度越高,運動能力 越差。小鼠較差的運動能力和較長的靜止時間 是抑郁的表現(xiàn) ;另有研究指出靜止時間反映小鼠 對周圍環(huán)境的好奇心,靜止時間越短,小鼠好奇心越強。
平均速度
老鼠在曠場實驗中運動總路程和時間的比值,可表示鼠的自主運動能力。
跨格次數(shù)
又稱水平得分,跨格一次是指鼠四 足均進入相鄰方格范圍內[34] ,分為中央格跨格次數(shù) 和周圍格跨格次數(shù)。有研究單純應用跨格次數(shù)這 一指標來反映大鼠的活動能力 。跨格次數(shù)的多少反映鼠的自發(fā)活動程度及興奮程度,大鼠出現(xiàn)抑郁時跨格次數(shù)減少。
中央格跨格次數(shù)
單純指動物進出中央格的次數(shù)。對于中央格的界定目前主要有兩種方法,一種 將與曠場反應箱壁相連的方格或者區(qū)域稱為周圍 格,不與反應箱壁連接的區(qū)域稱為中央格 ;另一種將中央格定義為與反應箱壁有一段距離的區(qū)域, 至于這段距離的長度可根據(jù)試驗設計具體設定。以上兩種方法中,第1種方法較為常用。中央格跨 格次數(shù)減少與小鼠焦慮狀態(tài)相關。
直立次數(shù)
又稱垂直得分、站立次數(shù),指鼠一對前足均騰空或攀附箱壁,站立后雙爪放下為直立一 次。直立次數(shù)反映鼠的探索行為及對新環(huán)境的好奇程度 ,然而在直立次數(shù)與焦慮情緒的關系上,目前沒有定論,有研究認為直立次數(shù)越多,說明動物越焦慮,而另有研究認為直立次數(shù)越少,動物越焦慮 。大鼠出現(xiàn)抑郁行為時,直立次數(shù)減少。
排便次數(shù)
又稱糞便粒數(shù),反映動物對陌生環(huán) 境的緊張和恐懼程度,自1934年Hall等第1次將嚙齒 類動物的排便次數(shù)與情緒建立聯(lián)系之后,人們普遍認為排便次數(shù)反映嚙齒類動物的焦慮程度 。*近有研究指出,在較短的實驗時間內,排便次數(shù)確實 可以作為反映動物焦慮情緒的有效指標,但如果實 驗時間超過30min,其與焦慮情緒的相關性還有待 深入研究。
修飾次數(shù)
又稱理毛次數(shù),指鼠對面部、四肢、 軀干和生殖器的清洗行為。鼠的修飾次數(shù)是對新 異環(huán)境產生的應激行為,說明此時鼠興奮度較高, 也有研究認為修飾次數(shù)反映動物身處新異環(huán)境時的警覺強度。
中央格停留時間和中央格停留時間百分比
鼠被放于中央格后至其四足均離開中央格時的這一 時間段和這一時間段占曠場實驗時間的比值即為 中央格停留時間和中央格停留時間百分比。嚙齒 類動物在空間活動時會本能避開中央?yún)^(qū)域,沿著邊 緣區(qū)域活動,理論上當鼠的認知能力受到影響時會導致其中央?yún)^(qū)域停留時間延長。Yadav 等 指出, 如果動物對新環(huán)境的認知能力差,則中央格停留時間延長。然而,有研究認為中央格停留時間的減少說明動物具有焦慮行為 。中央格停留時間與鼠對周圍環(huán)境的好奇度呈反比。
中央格運動時間和中央格運動時間百分比
指整個曠場實驗中鼠在中央格運動的總時間以及其 所占曠場實驗時間的百分比。中央格運動時間增 加與鼠的探索行為密切相關,中央格運動時間/中 央格運動時間百分比降低是鼠焦慮的表現(xiàn)。
周圍格運動時間和周圍格運動時間百分比
整個曠場實驗中鼠在周圍格運動的總時間以及其所 占曠場實驗時間的百分比。研究發(fā)現(xiàn)鼠在曠場中 央運動的時間增加,以及從周邊到中央潛伏期(將動物放入周圍格,動物從周圍格進入到中央格的時 間)的縮短是焦慮的表現(xiàn)。
跨格等級
反映整個曠場實驗測試中實驗動物對新奇區(qū)域、陌生區(qū)域感興趣的程度。
文章摘錄來源
國際麻醉學與復蘇雜志2020年5月第41卷第5期,董瑞,畢燕琳,王明山,《曠場實驗在鼠行為學研究中的應用》
動物行為分析軟件:
1、VisuTrack軟件
2、SuperMaze軟件
3、FishTrack斑馬魚分析軟件
動物行為儀器:
1、自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射(PPI)、跑步機、各類經典迷宮等
2、動物抓撓分析儀、動物震顫行為分析儀、動物捕食行為分析儀
3、動物主動步態(tài)分析、動物被動步態(tài)分析、動物自由步態(tài)分析(內測中)
4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉棒疲勞儀、鼠尾光照測痛儀等
神經電生理:
1、光遺傳、無線光遺傳
2、光纖記錄系統(tǒng)(單通道、多通道)
3、電生理信號采集系統(tǒng)(腦電、肌電等)