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幾種評(píng)估小鼠精神Ji病的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(大理石掩埋、筑巢、巢穴切碎實(shí)驗(yàn))


    在動(dòng)物模型中模擬人類精神和神經(jīng)發(fā)育障礙的各個(gè)方面是一項(xiàng)具有挑戰(zhàn)性的任務(wù)。盡管如此,小鼠已成為一種廣泛使用的模型系統(tǒng),用于研究這些ji病的病理生理學(xué)和治liao策略。然而,相應(yīng)的行為測(cè)試往往很復(fù)雜,需要豐富的行為測(cè)試經(jīng)驗(yàn)。在這里,我們提出了幾個(gè)簡(jiǎn)單的檢測(cè)方案,即筑巢、巢切碎及大理石掩埋實(shí)驗(yàn),這可以作為具有精神ji病(潛在)特征的小鼠模型的行為表型分析的起點(diǎn)。


筑巢測(cè)試

  1. 在測(cè)試前至少 7 天單獨(dú)飼養(yǎng)小鼠。確保飼養(yǎng)條件滿足共同標(biāo)準(zhǔn),例如受控照明( 12:12 小時(shí)明暗)、溫度和濕度以及低噪音水平、豐富的籠子環(huán)境以及隨意提供食物和水。測(cè)試可以在動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)住房室中進(jìn)行,以確保小鼠zui大限度地熟悉它們的環(huán)境。

  2. 測(cè)試前 24 小時(shí),從測(cè)試小鼠的籠子中取出任何筑巢材料。

  3. 避免任何可能在您的測(cè)試結(jié)果中引起偏差的設(shè)置(例如,在空間上分隔不同的測(cè)試組)。

  4. 在測(cè)試當(dāng)天(推薦是晚上),為每只測(cè)試?yán)鲜筇峁┮粋€(gè)小窩。使用干凈的鑷子分發(fā)巢穴。

  5. 通過拍照記錄試驗(yàn)開始時(shí)的狀態(tài)。

  6. 20 小時(shí)后,記錄現(xiàn)狀(“t20”)。注意不要打亂巢穴 。因此,避免動(dòng)物的任何激動(dòng)。因此,要拍照,請(qǐng)等到老鼠穩(wěn)穩(wěn)地坐在巢穴中(確保巢穴清晰可見)或自愿離開巢穴。不要強(qiáng)行將老鼠從巢中脫臼。確保記錄測(cè)試動(dòng)物的識(shí)別信息(例如,通過在描繪巢穴之前描繪包括鼠標(biāo) ID 在內(nèi)的籠子標(biāo)簽)。

  7. 48 小時(shí)后,通過將測(cè)試小鼠移動(dòng)到干凈的籠子來結(jié)束試驗(yàn)。記錄完成的筑巢情況并避免使其混亂。


Nestlet 切碎測(cè)試


  1. 在測(cè)試前至少 7 天單獨(dú)飼養(yǎng)小鼠。確保飼養(yǎng)條件滿足共同標(biāo)準(zhǔn),例如受控照明(在我們的案例中為 12:12 小時(shí)明暗)、溫度和濕度以及低噪音水平、豐富的籠子環(huán)境以及隨意提供食物和水。

  2. 測(cè)試前 24 小時(shí),從測(cè)試小鼠的籠子中取出任何用于筑巢和環(huán)境富集的材料。

  3. 在測(cè)試當(dāng)天,將測(cè)試動(dòng)物轉(zhuǎn)移到測(cè)試區(qū)域。確保動(dòng)物習(xí)慣于它們的環(huán)境以避免分心,例如不熟悉的氣味。這可以通過在房間的一個(gè)單獨(dú)空間中進(jìn)行測(cè)試來實(shí)現(xiàn),老鼠所在的房間就在其中。或者,在測(cè)試前的幾天讓小鼠習(xí)慣于測(cè)試區(qū)域,每天至少 1 小時(shí)。

  4. 從測(cè)試動(dòng)物的籠子中取出食物和水,并用表面光滑的透明物體代替蓋子,例如(玻璃或有機(jī)玻璃)板,以防止老鼠在測(cè)試期間攀爬。

  5. 用鑷子取一個(gè)小窩,稱重并將其放入試驗(yàn)動(dòng)物的籠子中。

  6. 通過在試驗(yàn)開始時(shí)拍照來確保文件。或者,可以使用自動(dòng)視頻系統(tǒng)(例如,VisuTrack、SuperMaze 或類似系統(tǒng))。確保記錄測(cè)試動(dòng)物的識(shí)別信息(例如,通過在描繪巢穴之前描繪包括鼠標(biāo) ID 在內(nèi)的籠子標(biāo)簽)。

  7. 啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。在 30 分鐘的觀察期間,與測(cè)試區(qū)域保持至少 1m 的距離。

  8. 30 分鐘后,停止試驗(yàn)并輕輕將試驗(yàn)動(dòng)物從籠子中取出。確保所有的巢材料都留在籠子里。

  9. 使用相機(jī)記錄試驗(yàn)結(jié)束后的狀態(tài)(圖 1)。

  10. 取出燕窩并稱重。如果燕窩被撕成幾塊,請(qǐng)使用zui大的一塊。不要包括在移除巢穴過程中脫落的碎片,但不要故意試圖甩掉松散的材料。

  11. 將 Nestlet 存放在塑料袋中以備文件使用。不要忘記用鼠標(biāo) ID 標(biāo)記袋子。

  12. 按順序測(cè)試動(dòng)物時(shí),在治liao組之間交替進(jìn)行以避免分析中的偏差。


大理石掩埋實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)前至少適應(yīng)測(cè)試室 1 小時(shí)。為了隔離外部因素,所有實(shí)驗(yàn)均在 130 × 80 × 80 cm 帶門的木箱內(nèi)進(jìn)行。6 毫米的高壓層壓墻內(nèi)襯有隔音泡沫,以減少外部噪音的滲透。測(cè)試是在一個(gè) 26.6 × 42.5 × 18.5 cm 的籠子(Eurostand 1291H-type III H)中進(jìn)行的,籠子放在一個(gè)高架的 10 毫米磨砂有機(jī)玻璃架子上。使用白色 LED 燈條從頂部和底部均勻照亮該設(shè)備,并使用 4.4-11 mm/F1.6ens (KOWA) 的高架相機(jī)以每秒 25 幀的速度記錄。


測(cè)試籠中裝有用于菌株 1-2 的木屑?jí)|料和用于菌株 3 的玉米芯墊料,高度約為 4 厘米。下一個(gè),20顆藍(lán)色玻璃彈珠均勻地分布在床上四排。在將動(dòng)物放入籠子后立即開始錄制,使用定制的盆景腳本。讓動(dòng)物探索該裝置 30 分鐘,然后將小鼠移出并拍攝自上而下的彈珠圖像。丟棄墊料,并在每次實(shí)驗(yàn)之間用 70% 乙醇清潔籠子。





動(dòng)物行為分析軟件:

1、VisuTrack軟件

2、SuperMaze軟件

3、FishTrack斑馬魚分析軟件

動(dòng)物行為儀器:

1、自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射(PPI)、跑步機(jī)、各類經(jīng)典迷宮等

2、動(dòng)物抓撓分析儀、動(dòng)物震顫行為分析儀、動(dòng)物捕食行為分析儀

3、動(dòng)物主動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物被動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物自由步態(tài)分析(內(nèi)測(cè)中)

4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉(zhuǎn)棒疲勞儀、鼠尾光照測(cè)痛儀等

神經(jīng)電生理:

1、光遺傳、無線光遺傳

2、光纖記錄系統(tǒng)(單通道、多通道)

3、電生理信號(hào)采集系統(tǒng)(腦電、肌電等)



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