視動反應(yīng)(optomotor response, OMR)
視動反應(yīng)是指斑馬魚對移動的目標(biāo)有一種追逐 的行為,該反應(yīng)可以用來檢測幼魚和成魚的視覺相 關(guān)基因突變。幼年斑馬魚發(fā)生明顯視動反應(yīng)的時(shí)期一般在7dpf 左右。將幼魚放在一個(gè)狹窄的長方形水缸中,在魚缸底部放置一個(gè)顯示器,當(dāng)顯示器中的光 柵朝向某個(gè)方向運(yùn)動時(shí),斑馬魚會朝著光柵移動的 方向運(yùn)動。多條魚進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),光柵發(fā)散或聚集, 魚群會表現(xiàn)出相應(yīng)的群體反應(yīng)(圖 2)。通過不斷變換光柵的呈現(xiàn)模式,可以篩選那些對光柵方向改變反應(yīng)遲鈍的個(gè)體,以達(dá)到篩選視覺基因缺陷體的目的。因?yàn)榭梢詫⒍鄠€(gè)魚缸并聯(lián)使用,由此可見這是 一種高通量的篩選方法。
成年斑馬魚的視動反應(yīng)裝置與幼年斑馬魚的眼 動反應(yīng)裝置有點(diǎn)類似(圖3)。斑馬魚在一個(gè)透光性 好的圓形魚缸中可以自由游動,魚缸中放置一個(gè)小圓柱以阻擋斑馬魚穿過中心區(qū)域游動。在魚缸的外圍放置一個(gè)可以轉(zhuǎn)動的塑料圓柱,塑料圓柱上貼上一張黑白條紋相間的白紙,在環(huán)形光源的照射下可以產(chǎn)生一組具有時(shí)間頻率和空間頻率的光柵.當(dāng)光柵轉(zhuǎn)動時(shí)斑馬魚會追隨光柵圍繞魚缸做圓周運(yùn)動,改變光柵的轉(zhuǎn)動方向,斑馬魚會對移動方向做出相應(yīng)的調(diào)整。Maaswinkel 等的研究發(fā)現(xiàn),斑馬魚對 低空間頻率的光柵刺激會有一個(gè)明顯的追隨反應(yīng), 而對于高空間頻率具有頻率選擇作用,對于時(shí)間頻率的反應(yīng)取決于光柵的空間頻率,固定空間頻率的情況下不同時(shí)間頻率有不同的追隨偏好。
逃避反應(yīng)(escape response)
Li 等1997 年曾使用該行為來定量地分析斑馬魚的視覺敏感性。斑馬魚放在一個(gè)類似于成年斑 馬魚視動反應(yīng)的裝置中(圖 4),外周的轉(zhuǎn)筒上涂上 一個(gè)某種顏色的條帶或圖案。正常情況下斑馬魚會繞擋筒做緩慢的游動,當(dāng)條帶刺激出現(xiàn)在斑馬魚的視野中時(shí),斑馬魚會迅速地決定是否要游開這個(gè)區(qū)域以躲避這個(gè)“捕食者”。這種逃脫行為一般情況下是很明顯的,正常的野生型斑馬魚在 50 次刺激 當(dāng)中會有 42 次左右的正向逃脫行為。如果成年斑馬魚對某個(gè)顏色習(xí)慣之后可以更換一種顏色刺激.調(diào)節(jié)刺激條帶的光學(xué)強(qiáng)度,可以檢測斑馬魚逃避反應(yīng)的激發(fā)閾值。
背光反應(yīng)(dorsal light reflex, DLR)
斑馬魚野外生存環(huán)境中太陽光從其背部投射下來,因此它們都有一個(gè)背向光源的習(xí)性,這個(gè)反應(yīng) 一般需要身體平衡感覺和視覺的參與。將斑馬魚倒 置或傾斜在一個(gè)比較狹小的玻璃管中,光源從魚的側(cè)面投射過來時(shí),斑馬魚會轉(zhuǎn)動身體以背對光源。 而當(dāng)光源繞著玻璃管緩慢旋轉(zhuǎn)時(shí),它也會緩慢地旋轉(zhuǎn)著自己的身體。這個(gè)反應(yīng)在斑馬魚的視覺功能檢測中可以簡單地檢測不同波長的視覺敏感性。但是Nicolson 等的研究指出,在斑馬魚的背光反應(yīng)中,發(fā)生明顯旋轉(zhuǎn)障礙的魚是那些平衡感覺存在缺 陷的突變體,而視覺信息在其中的作用不是十分地重要。
文章摘錄來源
生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展,《斑馬魚行為學(xué)實(shí)驗(yàn)在神經(jīng)科學(xué)中的應(yīng)用》,鄒蘇琪,殷梧 ,楊昱鵬, 陳林,胡兵,DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00403
動物行為分析軟件:
1、VisuTrack軟件
2、SuperMaze軟件
3、FishTrack斑馬魚分析軟件
動物行為儀器:
1、自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射(PPI)、跑步機(jī)、各類經(jīng)典迷宮等
2、動物抓撓分析儀、動物震顫行為分析儀、動物捕食行為分析儀
3、動物主動步態(tài)分析、動物被動步態(tài)分析、動物自由步態(tài)分析(內(nèi)測中)
4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉(zhuǎn)棒疲勞儀、鼠尾光照測痛儀等
神經(jīng)電生理:
1、光遺傳、無線光遺傳
2、光纖記錄系統(tǒng)(單通道、多通道)
3、電生理信號采集系統(tǒng)(腦電、肌電等)