一、實驗原理

新物體識別實驗基于嚙齒類動物對新穎物體的天然探索偏好，通過檢測小鼠對新舊物體的探索時間差異，評估其空間記憶與認知能力。該實驗成本低、操作簡單，廣泛應用于神經科學、藥wu篩選及行為學研究。

二、實驗流程

1. 實驗準備

實驗箱：透明塑料或玻璃箱（推薦尺寸：40×40×40 cm），底部鋪墊干凈墊料，保持環境安靜、光線柔和（約200 lux）。

實驗物體：選擇無氣味、非毒性材質（如塑料、金屬）的物體，形狀差異明顯（如立方體、圓柱體），避免小鼠因材質偏好影響結果。實驗分組對照組（正常小鼠）與實驗組（如藥wu處理組），每組≥10只，隨機分配。

2. 訓練階段（Habituation）

適應環境將小鼠放入空實驗箱，自由探索10分鐘，消除環境應激。物體預暴露移除小鼠后，在箱內放置兩個相同物體（A、A’），小鼠返回后繼續探索10分鐘，確保其對物體無恐懼。

3. 測試階段（Testing）

替換新舊物體：移除一個舊物體（A），替換為新物體（B），保持位置隨機（避免空間偏差）。

記錄探索時間：通過視頻跟蹤軟件（如EthoVision）或人工記錄，統計小鼠探索新舊物體的時間（鼻尖接觸物體≥1秒計為有效探索）。

測試時長：通常為5-10分鐘，時間過長可能導致小鼠疲勞。

4. 數據分析

辨別指數（DI）計算公式：DI = (新物體時間 - 舊物體時間) / (新物體時間 + 舊物體時間) ×100%。

判斷標準DI≥0表示偏好新物體（正常認知），DI<0或無顯著差異提示認知障礙。

三、避坑指南

1. 實驗設計階段

樣本量不足

每組至少10只小鼠，個體差異可能導致結果偏差。物體選擇不當避免使用帶孔洞、可移動的物體（可能引發啃咬或恐懼），確保新舊物體材質、重量一致。環境干擾實驗期間保持安靜，避免震動或噪音；實驗箱需徹底清潔（75%酒精擦拭），防止氣味殘留干擾。

2. 訓練與測試階段

適應時間不足跳過訓練階段直接測試會導致小鼠焦慮，探索時間縮短。位置偏好干擾固定物體位置可能讓小鼠因探索習慣而非記憶產生偏差，建議每次測試隨機更換物體位置。測試時長過長超過10分鐘易導致小鼠疲勞，探索行為減少。

3. 數據分析階段

• 忽略個體差異

• 需剔除探索時間總和＜10秒的小鼠（可能因病或應激）。

• 未重復實驗

• 至少重復3次獨立實驗，避免偶然性誤差。

• 數據正態性檢驗

• 若數據不符合正態分布，改用非參數檢驗（如Mann-Whitney U檢驗）。

四、常見問題與解決方案

問題1：小鼠不探索物體

→ 檢查物體清潔度、氣味；增加適應時間或更換更醒目的物體（如反光材質）。

問題2：DI值波動大
→ 確保實驗條件一致（如光照、溫度）；增加樣本量。

問題3：藥wu干預后DI未變化
→ 確認藥wu劑量與給藥時間合理；延長測試間隔觀察長期效應。

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