摘要: 目的 探討電針對創傷后應激障礙( PTSD) 大鼠體重和空間學習記憶的影響。方法 將 25 只雄性健康 SD 大鼠隨機分為模型組、模型西藥組、模型電針組、電針對照組、正常對照組等 5 組,每組各 5 只( 群養) 。造模成功后給予不同處理,**結束后稱量每只大鼠體重,并采用 Morris 水迷宮實驗評價大鼠空間學習記憶能力。結果 與模型組比較,模型電針組、模型西藥組體重明顯增加,在水迷宮內尋找平臺逃避潛伏期明顯縮短,在第 III 象限游動時間比例上升并在該象限穿越次數明顯增多,且兩組之間各項指標并無顯著差異; 而電針對照組與正常對照組各項指標差異不顯著。結論 電針**可明顯改善 PTSD 大鼠空間學習記憶能力,并對 PTSD 大鼠體重有較好調整作用。
關鍵詞: 創傷后應激障礙; 電針; 體重; 空間學習記憶; Morris水迷宮
創傷后應激障礙( post - traumatic stress disorder,PTSD) 是指機體在異乎尋常的威脅或災難后延遲出現并長期維持的精神障礙,臨床主要表現為病理性重現、持續警覺性增高、持續回避、對創傷性經歷的選擇性遺忘等。本實驗采用與人類 PTSD的發生和發展機理更為接近的 PTSD 模型探討電針對 PTSD 大鼠體重和空間學習記憶的影響。電針對大鼠體重和空間學習記憶的影響
1 材料與方法
1. 1 材料
西藥鹽酸帕羅西汀由浙江華海藥業股份有限公司提供。Morris水迷宮購自上海欣軟信息科技有限公司,由圓形不銹鋼制水池和圓柱形鐵制平臺兩部分組成: 水池直徑180 cm,高50 cm,池壁漆成黑色,平臺高 28 cm,直徑 10 cm。LH201 型電針儀購自北京華衛產業開發公司。電子動物秤由電針對大鼠體重和空間學習記憶的影響Electronic Balance Precision Instrument 提供。
1. 2 方法
1. 2. 1 動物分組和 PTSD 模型的建立: 選取雄性健康 SD 大鼠25 只,清潔級,體重相當,均為 180 ~ 220 g( 大鼠及飼料購自黑龍江中醫藥大學實驗動物中心,合格證號: 黑動字第 P00701109) 。隨機分為模型組、模型西藥組、模型電針組、電針對照組、正常對照組 5 組,每組各 5 只( 群養) 。大鼠在動物室適應 1 周后,除電針對照組和正常對照組外均接受相同的應激刺激: 將大鼠束縛2 h后,立即強迫游泳20 min( 水深50 cm,直徑20 cm,玻璃缸裝滿2/3,水溫 25℃) ; 恢復15 min,用乙醚麻醉至大鼠意識喪失,放于通風處待其自然蘇醒,之后對其足底施以不可逃避電刺激( 48 V) 10 s。造模結束后將大鼠放入籠中常規喂養。
1. 2. 2 **方法: 造模后第4 d即開始對 5 組實驗大鼠進行不同處理: ( 1) 模型組和正常對照組不予干預,常規喂養; ( 2) 模型西藥組在其飲用水中加入規定劑量的鹽酸帕羅西汀緩釋片( 加入前研末并搖勻至充分溶解) ; ( 3) 模型電針組和電針對照組進行電針**,每日 18: 00 開始固定大鼠,參照《實驗針灸學》的動物穴位圖譜定位,選“百會”、“大椎”穴進行針刺,“百會”平刺、“大椎”斜刺,進針深度 0. 5 寸,針柄接電針儀,( 正極在上,負極在下) 選用連續波,頻率為2 Hz,刺激強度以大鼠頭部輕微抖動為宜,1 次/d,20 min/次,共針刺10 d。為盡量減少誤差,模型組、正常對照組、模型西藥組均于每日 18: 00 進行與模型電針組、電針對照組相同的固定,但不給予電針**。
1. 2. 3 檢測方法: ( 1) 體重測量: 分別于**前、后用電子動物秤稱量并記錄各組大鼠體重。( 2) Morris 水迷宮實驗: 于造模后第2 d開始進行,一共進行3 d。將水池按順時針方向劃分為I、II、III、IV 等 4 個象限,平臺放于第 III 象限中央。池內注入自來水,水面超過平臺2 cm,水溫恒定在( 25 ± 1. 0) ℃,水中加入適量食用黑色素染黑以增強對比度,避免數據采集時出現干擾。水池周圍每個象限貼一塊白色膠布作為大鼠的視覺線索。迷宮上方安置連接電腦的攝像機,記錄大鼠的運動軌跡,并用Morris 水迷宮數據采集和分析軟件記錄相關數據和圖像結果。迷宮和攝像頭外周用黑色遮光幕布,以避免外界環境干擾。( 3) 定位航行實驗: 將大鼠從不同象限面向池壁放入水中,記錄大鼠從入水至發現并爬上平臺的時間( 稱為逃避潛伏期) ,每次訓練90 s,于平臺停留2 s后 1 次記錄結束。第1 d訓練 9 次,第2 d訓練 6 次,每 3 次的均值作為 1 次平均訓練潛伏期,共得出 5 個均值,作為大鼠的空間學習能力。如在90 s內未找到平臺,則逃避潛伏期記錄為90 s,并引大鼠至平臺并停留30 s以熟悉平臺位置。每次訓練結束后,將大鼠擦拭吹干以防狀態不佳。( 4) 空間探索實驗: 第3 d移走平臺,選任一點將大鼠放入水中90 s,記錄大鼠穿越平臺所在象限的次數以及在第 III 象限中停留時間的百分比,作為大鼠空間記憶能力。
1. 3 數據處理
實驗所得各組數據用( X珔 ± S) 表示,用 SPSS17. 0 統計軟件包進行分析,采用方差分析方法進行多組間比較。P <0. 05 為有統計學意義。
2 結果
2. 1 電針對 PTSD 大鼠體重的影響
與模型組比較,模型電針組、模型西藥組大鼠體重明顯增加; 而電針對照組與正常對照組大鼠體重差異不顯著。
2. 2 電針對 PTSD 大鼠學習記憶的影響
與模型組比較,模型電針組、模型西藥組大鼠在水迷宮內尋找平臺逃避潛伏期明顯縮短,空間探索實驗中在第 III 象限游動時間比例上升,并在平臺所在象限穿越次數明顯增多; 而電針對照組與正常對照組比較各項指標均無明顯差異。
3 討論
PTSD 的概念形成始于戰爭,后經流行病學調查顯示,自然災害、嚴重事故、重大流行性**都可引起,嚴重損害人類行為、心理、認知、精神等功能。就如何防治 PTSD 的發生,申遠等總結了各項研究領域的現有證據并且提出了 PTSD **指南。帕羅西汀是常用的抗抑郁**,屬于選擇性 5 - 羥色胺再攝取抑制劑( SS - RIs) ,臨床上被應用于抑郁癥的**并取得良好療效,近年來更被應用于 PTSD 的**。陳云春等的實驗研究表明: 較低劑量帕羅西汀預防 PTSD 的效果明顯較好。本實驗造模成功后采用電針“百會”、“大椎”穴** PTSD大鼠,試圖為臨床 PTSD 患者開辟一條新的**有效的**道路。**后,采用 Morris 水迷宮實驗測試各組大鼠學習記憶能力。研究結果顯示: 與模型大鼠相比,模型電針組、模型西藥組體重明顯增加,在水迷宮內尋找平臺逃避潛伏期明顯縮短,在第 III 象限游動時間比例上升,并在該象限穿越次數明顯增多,且兩組之間各項指標并無顯著差異; 而電針對照組與正常對照組各項指標差異不顯著。楊俊的研究表明,電針“百會”、“大椎”穴顯著增強了大鼠的學習和記憶能力,而一定參數的電針刺激作用于“百會”、“大椎”則可改善大鼠學習記憶障礙。百會與大椎屬督脈穴,“督為陽脈之海”,元神之府,上行入腦。百會位于顛頂,醒腦益智,屬局部取穴; 大椎為“三陽督脈之會”,與百會相配取穴,效果更佳。本實驗與此結論相一致,有效降低了 PTSD 對大鼠認知能力的損害。
4 結論
PTSD 可以導致大鼠的進食狀態不佳,體重增加量小,學習記憶能力下降( P < 0. 05) 。模型電針組大鼠體重增加量明顯多于模型組( P <0. 05) ,并且在 Morris 水迷宮得分高于模型組( P <0. 05) ,提示電針可以調整 PTSD 大鼠的食欲,改善其學習記憶能力。模型電針組與模型西藥組相比,兩種**方法對PTSD 大鼠體重的增加量和水迷宮實驗的測試得分無顯著性差異( P >0. 05) ,提示電針**對于 PTSD 大鼠的體重調整、學習記憶能力的改善作用與西藥相當。電針對照組與正常對照組比較,各項指標無顯著性差異( P > 0. 05) ,提示電針**對大鼠的創傷性刺激不明顯。