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http://www.labome.cn/method/Behavioral-Phenotyping-in-Rats-and-Mice.html大鼠和小鼠是行為神經學研究中*常用的動物模型。它們是非常合適的模型體,因為它們能夠表現出與人類**相關的各種行為。神經行為研究的初期,大鼠是*常用的模式生物。大鼠在許多標準的神經藥理學任務中表現良好,而且它們身體的大小使我們更容易對其進行侵入性操作。不過,近來由于直接操縱基因技術的出現,小鼠已經成為神經科學研究的重要工具,這使得科學家們能夠研究單個基因對發育和行為的影響。針對嚙齒類實驗動物有各種各樣的行為測試,從測試基本的運動和感覺功能,到分析更復雜的有關認知和情緒的行為。本文旨在簡要介紹不同研究中*常用的大鼠和小鼠的行為測試方法,以及為更深入的方法回顧提供參照。
測試 | 物種 | 注意事項 |
基本運動和感覺功能 |
家籠活動HomeCage | 大鼠,小鼠 | 可快速的進行或以24小時為周期進行 |
旋轉桿Rotarod | 小鼠 | 需要進行訓練 |
熱疼痛測試儀Hotplate(痛覺) | 大鼠,小鼠 | 實驗對象需被關照以避免受傷 |
學習和記憶 |
Morris水迷宮 | 大鼠,小鼠 | 需多日的訓練 |
Barnes迷宮 | 大鼠,小鼠 | 需多日的訓練, |
八臂迷宮 | 大鼠 | |
物體識別 | 大鼠,小鼠 | |
條件性恐懼 | 小鼠 | 能夠提供暗示或具有關聯情境,需具不同的神經回路;此行為能夠消失和復原, |
社會行為 |
群體接觸/偏好 | 大鼠,小鼠 | 需要一只同種老鼠作為目標,在測試前建議分居 |
性行為 | 大鼠 | 應在暗循環中測定 |
母性行為 | 大鼠,小鼠 | |
焦慮樣和抑郁樣行為 |
強迫游泳測試 | 大鼠,小鼠 | 大鼠通常需要2個游泳階段來達到足夠的不動性 |
懸尾實驗 | 小鼠 | |
高架十字迷宮 | 大鼠,小鼠 | 操作/測試前高度敏感 |
明/暗箱 | 小鼠 | |
聽覺驚嚇 | 大鼠,小鼠 | 反應因年齡不同而不同,應在隔音的小室中進行, |
弱刺激抑制 | 大鼠,小鼠 | 與聽覺驚嚇相似 |
獎勵 |
條件性位置偏愛 | 大鼠,小鼠 | 需要多個訓練時期;此行為能消失和復原 |
蔗糖偏愛 | 大鼠,小鼠 | |
自身給予 | 大鼠,小鼠 | 在大鼠中*常用;可使用不同程度的強化刺激;此行為能夠消失和復原 |
動物模型的行為范例中許多存在神經精神障礙(焦慮,抑郁,精神分裂癥,自閉癥,癖嗜,注意力缺陷多動障礙,創傷后應激障礙)和神經退行性**(帕金森,老年癡呆癥和亨廷頓**;中風;和正常老化;表1列出了在這篇文章中所描述的測試)。然而,并非所有的測試都是平等的。每當從事一個嚙齒類動物的行為實驗,重要的是要建立對特定模型行為或**研究的有效性。一個好的動物模型應該能夠合理的比擬人類的表現與癥狀,被評估的行為,應該能夠被客觀地衡量,該行為應對人類已知的有效**方法有回應,并且這些結果能夠再次呈現。研究人員往往把模型拆分為對建構效度,預測效度,或表面效度(見表2)進行測試。一個很好的動物模型,不一定需要滿足所有三個標準,但是這些方面在實驗設計和數據分析中都需要被考慮到,從而確定這些被研究的行為與人類真實狀況有多大關系。
大鼠和小鼠 - 行為表現型研究的動物模型
n 基本的感覺和運動功能
ü 家籠活動
許多下面描述的測試都對感覺和運動功能的變化敏感。因此,重要的是要確定一個變異的或被施藥的老鼠,在用其解釋依賴于正常運動和感覺功能的其他測試結果之前,是否具備完整的感覺和運動反應。運動的*基本的評估是監測在家籠環境中的活動。雖然活動可以人為地由訓練有素的觀察員監測,它也可以由放置在籠外圍的一圈紅外照相束來獲取(圖1)。它的軟件用來衡量在水平和垂直方向的運動。可用于監測24小時期間是否有任何晝夜節律的改變。相同的設置還可以監視在一個新的環境中的活動,是探索或焦慮的行為衡量尺度 。測試小鼠和大鼠測試的**區別是自動監測照相束的間距不同。
ü 旋轉桿 Rotarod
加速旋轉桿是用來衡量協調和平衡能力的。這個測試主要用于小鼠,它需要一個特殊的儀器使轉速能夠在4和50轉之間(圖2)。在*初的試驗中,需訓練小鼠能在固定桿上保持平衡,然后保持在以4轉速旋轉的桿上至少60秒。一旦這種能力水平已經達到了,桿被設置為在5分鐘內從4轉到48轉加速旋轉。記錄小鼠掉落時所過的時間和當時的轉速。運動學習也可以在隨后的加速試驗中通過檢查表現的提升而得到評估。 旋轉桿測試常被用來篩選新藥可能的副作用在動物早期發育過程中對動作協調性的影響 。其他對于運動協調能力缺乏的測試包括走平衡木和足跡分析。大鼠和小鼠 - 行為表現型研究的動物模型
ü 嗅覺
基礎感覺功能的研究應確保變異的小鼠可以正常的看、聽和聞。下面描述的許多測試依賴于完整的視覺(Morris水迷宮,條件性位置偏愛,情境恐懼條件反射)或聽覺系統(驚嚇,暗示恐懼調節)。在這些測試中出現的異常或意外結果可能是指示有感覺缺陷,應作進一步調查。小鼠和大鼠都是嗅覺高度靈敏的動物,可將一些需靠視覺提示完成的測試轉變為嗅覺提示。基本嗅覺功能可以通過測量小鼠在偵查蘸有熟悉氣味的棉簽相對于新鮮氣味所用時間的不同很容易地檢測出來 。
ü 痛覺
痛覺(疼痛)研究與感覺功能密切相關,而且它對于研究人類慢性疼痛和研發止痛藥具有重要意義。很多測試可以評估嚙齒類動物的痛覺。其中*常見的涉及到對熱刺激的反應。一個標準的熱痛覺測試包括把動物放置在一個溫熱的表面上(小鼠55C或大鼠52.5C)并測量時間(一般為10-30秒),直到動物舔身體,起身,搖它的爪子,或企圖跳下熱疼痛測試儀。 類似的試驗還包括使尾部接觸高溫表面,將其浸在熱水中或使用發光熱源,以用來評估逃避時間。研究人員在研究疼痛反應時,應考慮到為實驗動物制造痛感所涉及的倫理問題 。 上述試驗均為使受傷風險降至*低而設計。
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