分為訓練和測試兩階段
(一)訓練階段(**天)
1.調試儀器,以確保格柵地板有電流刺激,擴音器有聲音刺激,并分別記錄電流強度和聲音強度(分貝)。
2.將大鼠放入條件恐懼箱2min(A相),記錄這*初2min內動物的凝滯(freezing)時間作基線。
3.接著加入卡嗒聲,80Db,30s(B相)。
4.緊接著再給予電擊,0.35mA,2s(C相),完成一輪訓練。如需要多輪訓練,則重復A、B、C三相訓練即可。
5.記錄整個訓練階段動物凝滯時間(s),用以測量動物的非條件恐懼(unconditioned fear)。
6.將大鼠移開操作箱。用70%的酒精或4%醋酸溶液徹底清潔操作箱,以備進行下一批動物的訓練。
(二)測試階段 在訓練后的**天進行,包括關聯(context)測試、變更關聯(altered context)或條件刺激前(pre-conditioning-stimulus,pre-CS)測試以及條件刺激(conditioning stimulus,CS)測試。測試階段沒有電擊刺激。關聯測試和變更關聯測試中也沒有聽覺條件刺激,但每只動物所用的操作箱應與訓練階段的相同。
1.關聯測試 將動物放入箱內,計算機自動記錄動物的凝滯行為。若用人工觀察,則觀察者(應不知道動物的處理或基因型)用靜聲秒表通過箱門上的貓眼(小窗口)觀察動物的行為并計分:凝滯為1分,活動(moving)為0分(也有只記錄凝滯時間)。每10秒觀察一次,共5min,這樣可記錄到30次(bout)可能的凝滯(即*大凝滯得分為30分)。用在這一階段記錄到的、動物在同一操作箱內的凝滯時間測量動物的關聯條件恐懼(contextually conditioned fear)。此為關聯測試。觀察結束后將動物放回籠內,清潔操作箱,進行下一只動物的觀察。
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