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穿梭、避暗(明暗箱)實驗方法

穿梭、避暗(明暗箱)實驗方法

回避實驗是利用動物的好暗避光(明暗穿梭)、對厭惡刺激(如足電擊)的恐懼和記憶而建立起來的。所以對實驗者(而不是對動物)而言,回避實驗在技術(shù)上與暗示關(guān)聯(lián)條件恐懼相類似。所用的刺激為溫和的足電擊,發(fā)生的反應(yīng)是動物逃避曾經(jīng)受到電擊刺激的地方。根據(jù)動物的逃避方式分為主動回避和被動回避(active and passive avoidance)。前者要求動物主動從有厭惡刺激的箱中逃離;后者則要求動物遏制自己而不進入有厭惡刺激的箱。根據(jù)所用儀器設(shè)備的不同又可分為穿梭回避、跳臺回避、Y-形迷宮回避。這里主要介紹前兩種回避。

   一、 實驗設(shè)備
        
(一)穿梭回避實驗設(shè)備  包括穿梭箱、刺激控制器和計算機。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司提供的穿梭箱。它包括左右兩個同等大小(20.3cm*15.9cm*21.3cm)的隔室(compartment)。其中一隔室用一黑色布套包裹,形成暗箱(主動回避可不用暗箱)。兩隔室之間由一個拱形門(8.9cm*11.4cm)相聯(lián),門可由實驗者根據(jù)實驗需要關(guān)上或打開。隔室地板為不銹鋼柵欄(直徑:大鼠4.8mm,小鼠3.175mm)。暗箱一側(cè)的柵欄地板與刺激器相聯(lián),并可給予電擊;明箱一側(cè)則不與刺激器相聯(lián),故沒有電流通過。
      (二) 跳臺回避實驗裝置  將上述穿梭箱的中門移去,代之以一個平臺(可隨Med Associates穿梭箱配套),即可改裝成跳臺回避實驗裝置。這里介紹美國另外一個儀器公司Coulboum儀器公司的跳臺回避裝置。它包括一個15cm*25cm*10cm的透明有機玻璃跳臺箱、一個隔音外箱(48cm*62cm*24cm)和一臺脈沖電刺激器組成。跳臺箱底部的柵欄與刺激器相聯(lián),中央固定一個3.5cm*3.5cm*2.5cm的木制平臺。實驗時,將跳臺箱放入隔音箱內(nèi),以防外界干擾。

  二、實驗方法
    
 (一)小鼠穿梭被動回避實驗(mouse step-through passive avoidance
          1.單次電擊刺激訓(xùn)練

    (1)將小鼠放入明箱,10s后,將明暗箱之間的門打開。多數(shù)品系的小鼠有很強的探究行為,喜暗惡光。因此,小鼠會很快進入暗箱。
   
2)小鼠(四肢)完全進入暗箱后,立即將中門關(guān)上,并給予一次電擊。電擊強度為能引起小鼠退縮和發(fā)聲的*小電流。根據(jù)小鼠品系不同,電流范圍為0.2~0.8mA(100V50~60Hz AC),持續(xù)1~2s。
     
3)讓小鼠在暗箱內(nèi)停留10s(以使讓動物形成箱與電擊之間的關(guān)聯(lián)),將小鼠放回籠內(nèi)。清潔操作箱。進行下一只動物的訓(xùn)練。

          2.記憶保持測試(retention test  電刺激訓(xùn)練24h后,將小鼠放回明箱,中門打開,但不給電擊。

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